Molekularbiologie (NAT-Diagnostik)


Leiter:

Prof. Dr. med. Peter-Michael Rath

Tel.:

0201 723 3538

E-Mail:

peter-michael.rath@uk-essen.de

 

Leiterin:

Dr. med. Hedda-Luise Verhasselt

Tel.:

0201 723 85429

E-Mail:

hedda-luise.koehling@uk-essen.de

 

Labor Tel:

0201 723 3504

Labor für Molekularbiologie

Die molekulare Diagnostik ermöglicht eine rasche und spezifische Diagnosestellung und liefert die Grundlage für eine gezielte antiinfektive Therapie. In dem Labor für Molekularbiologie des Institutes für Medizinische Mikrobiologie werden verschiedene humanpathogene Bakterien, Pilze und Parasiten mittels erreger-spezifischen Nukleinsäure-Nachweisen ohne Kultivierung rasch direkt aus Patienten-material identifiziert. Bei einigen Indikationen werden Multiplex-Systeme zum gleichzeitigem Nachweis verschiedener Erreger aus der gleichen Probe eingesetzt, z.B. aus Blut bei Verdacht auf Sepsis, aus respiratorischen Materialien bei Verdacht auf Pneumonie, aus Liquor cerebrospinalis bei Verdacht auf Meningitis und aus Proben aus dem Urogenitalbereich bei Verdacht auf sexuell übertragene Infektionen. 

In ausgewählten Fällen werden zusätzliche wichtige Informationen zur Antibiotika-resistenz gewonnen. Mittels einer Sequenziereinheit können Bakterien und Pilze bis zur Speziesebene identifiziert werden. Insbesondere bei Pilzen ist die korrekte Identifizierung für die Substanzauswahl bei der Therapie essentiell. Darüber hinaus werden Feintypisierungen von Krankheitserregern für epidemiologisch-krankenhaus-hygienische Fragestellungen durchgeführt. Dafür stehen die wichtigsten molekular-biologischen Techniken (PFGE, RLPF, SSCP, RAPD, Mikrosatelliten-Analyse) zur Verfügung. Einer der wissenschaftlich-diagnostischen Schwerpunkte ist der molekular-biologische Nachweis von Pilzen (Candida, Aspergillus, Pneumocystis, Mucormyzeten) inklusive dem Nachweis von Resistenz-assoziierten Genabschnitten.

Eine Übersicht über unser Leistungsspektrum gibt die Tabelle.

 

 

 

Erreger

Methode

Anbieter

Untersuchungsmaterial

Empfohlene Probenmenge

Zielsequenz/-gen

Aspergillus fumigatus/ terreus/ spp.

Real time PCR

PathoNostics

 flüssige respiratorische  Materialien, Gewebe

2ml, 1x1cm

ribosomales 18S Gen

B. pertussis, parapertussis und bronchiseptica *

kA

Fremdleistung Labor Eberhard Dortmund

 flüssige respiratorische  Materialien, Kultur, Rachenabstriche

kA

kA

C. difficile Toxin AB

Real time PCR

Cepheid/ Quidel

Stuhl

kA

genomische DNA

C. trachomatis/ N. gonorrrhoeae

Real time PCR

Cepheid

Augen-, Urogenital-, Rachen-, Analabstriche, Ejakulat, Urin

kA

genomische DNA und kryptisches Plasmid

C. trachomatis Serovartypisierung L1-L3 (Lymphogranuloma venerum)

Real time PCR

In house Methode

Urogenital-, Analabstriche, Urin

kA

kA

C.pneumoniae, M.pneumoniae, L.pneumophila/ longbeachae. (CAP-Erreger)

Real time PCR

Mikrogen

 flüssige respiratorische  Materialien, Liquor

2ml

C.pn.: 82bp (Pst I-Fragment); M.pn.: 76 bp (P1-Gen); L.pn.: 73bp (MIP)

Carbapenemase-PCR 

Real time PCR 

Cepheid

Kultur

kA

kA

EHEC

LAMP

Amplex

Kultur

kA

genomische DNA

H. influenzae, S. pneumoniae, N. meningitidis, E. coli, L. monocytogenes (Meningitis-Erreger)

LAMP

Amplex

Liquor

< 500µl

genomische DNA

Identifizierung von Pilzen/ Bakterien

Sequenzierung

in house Methode

Kultur

kA

Pilze: ITS1- und ITS2-Region; Bakterien: 16s

M. tuberculosis- Komplex

Real time PCR

Cepheid/ Sacace

Liquor, flüssige respiratorische  Materialien, Punktate, Gewebe

1ml

159bp  Sequenz gnomischer DNA/ IS6110

Makrolidresistenz/ Chinolonresistenz M. genitalium

kA

Fremdleistung Institut für Med. Mikrobiologie, Carl Gustav Carus Universität, Dresden

DNA-Eluate aus Urogenitalabstriche, Urin, Ejakulat, Analabstriche, Rachenabstriche

kA

kA

Malaria-PCR (M. falciparum, M. vivax, M. ovale, M. malariae, M. knowlesi)

Real time PCR

Altona Diagnostics

EDTA-Vollblut,

500µl

18s und 28s rRNA

MRSA 

Real time PCR/ LAMP

Cepheid/ Amplex

Nasen- und Rachenabstriche (Cepheid)/ Kultur (Amplex)

kA

SCCmec

N. gonorrhoeae

Real time PCR

Cepheid/ Mikrogen

Augen-, Urogenital-, Rachen-, Analabstriche, Urin

kA

genomische DNA ?

Nachweis Azol-Resistenz (A. fumigatus) 

Realtime PCR + Schmelzkurvenanalyse

PathoNostics

 flüssige respiratorische  Materialien, Kultur

kA

cypA51-Gen

Panfungale PCR

Endpunkt PCR/ Sequenzierung

in house Methode

auf Anfrage

auf Anfrage

ITS-Regionen, 28s rRNA-Gen

Pneumocystis jirovecii

Real time PCR/ LAMP

Altona Diagnostics/ Amplex

 flüssige respiratorische  Materialien

< 500µl

genomische DNA

Pneumonie-Erreger

Multiplex Endpunkt PCR ("Unyvero®") 

Curetis

 flüssige respiratorische  Materialien

200µl

16s / IST-Regionen von Bakterien u. Pilzen

 PVL (Panton-Valentine Leukocidin) (S.aureus/ MRSA)

LAMP

Amplex

 Kultur

Kultur

lukS/ lukF

Schimmelpilze der Ordnung Mucorales

Realtime PCR

PathoNostics

 flüssige respiratorische  Materialien, Liquor

1ml

28S rRNA-Gen

Sepsis-Erreger 

Microarray

Cube Dx

EDTA- Vollblut

2x 2ml

16S, 28S

Toxoplasma gondii

Real time PCR

Sacace

Liquor,  flüssige respiratorische  Materialien, EDTA-Vollblut, Glaskörperpunktate

500µl bzw. 200µl (EDTA)

529bp tandem repeat

Tropheryma whipplei

kA

Fremdleistung  Moter Diagnostics Berlin

Gewebe

kA

kA

Genotypisierung A. fumigatus, A.flavus, C. krusei, C. bertholletiae, M. pachydermatis, E. dermatitidis ( F )

Mikrosatelliten-PCR 

in house Methode

Kultur

Kultur

repetetive DNA-Sequenzen

Ureaplasma parvum, urealyticum, M. hominis, M. genitalium, T. vaginalis, C. trachomatis, N. gonorrhoeae (STD-Multiplex-PCR)

Real time PCR

Mikrogen

Urogenitalabstriche, Urin, Ejakulat, Analabstriche, Rachenabstriche

kA

genomische DNA

 

F = Forschung, auf Anfrage                                                     Stand: 24.09.2021